引言

• 血液系统恶性肿瘤分类：分为髓系和淋巴系肿瘤
• 细胞遗传学异常意义：作为关键诊断和预后标志物，在不同疾病中表现不同，且影响治疗选择
• 核型分析作用：为诊断、风险分层、预后评估、治疗选择和克隆演变监测提供重要信息
• 共识制定目的：建立统一操作标准，提高诊断精度和治疗效果

标本采集和要求

• 采样时间
  • 初诊患者：治疗前采样
  • 化疗患者：化疗间歇结束时检查
  • 服用羟基脲的 CML 患者：停药 2 周后采样
• 样本要求
  • 首选骨髓液：5 mL
  • 可用外周血情况：新诊断 CML 和急性白血病、CLL、B - CLPD 等特定情况
• 样本保存和运输
  • 采集容器：含肝素钠抗凝剂或骨髓培养基的无菌管
  • 保存条件：2 - 8°C 骨髓细胞保存液
  • 运输注意：避免长时间运输
• 测试申请表：包含患者基本信息、诊断等内容

细胞培养

• 直接法：适用于 AML、ALL 等，不提前培养，直接处理标本
• 短期培养法：适用于多数血液系统恶性肿瘤，调整细胞浓度后培养
• 特殊培养方法
  • CLL 和 B - CLPD：用含 CpG - ODN 和 IL - 2 的培养基培养
  • 成熟 T 细胞肿瘤：用含 PHA 的培养基培养
  • 浆细胞疾病：用含 IL - 4 的培养基培养

染色体收获和显带

• 染色体收获
  • 加入秋水仙素：终浓度 0.05μg/mL，B - CLPD 等患者提前 3.5 h 加入
  • 收获过程：包括离心、低渗处理、固定等步骤
• 滴片技术：控制温度和湿度，合适高度滴加细胞悬液
• 染色体显带和染色
  • 显带技术分类：全染色体显带和特定区域显带
  • 常用显带方法：G - 显带和 R - 显带

图像采集和处理

• 自动扫描采集：用染色体扫描工作站
• 手动采集分析：低倍镜后高倍镜检查

核型分析

• 分析原则：随机选择中期细胞
• 分析数量：至少分析 20 个中期细胞
• 异常处理：质量差时增加细胞数或重复显带分析

报告

• 基本信息：包括机构、患者、标本等信息
• 染色体图像：原中期细胞图像和核型图像
• 核型书写：按 ISCN 标准，移植患者有特殊记录方法
• 核型描述：记录染色体数目和结构异常，评估复杂性和临床意义
• 结果解释：结合临床病史，影响诊断或治疗时及时沟通并建议进一步检查

实验室管理与要求

人员要求

• 核型分析技术员需完成在职培训、技能评估和能力评价，定期参加培训和能力评估，参与比较评估，持续学习并了解共识
• 报告分析师需全面了解血液系统恶性肿瘤相关染色体异常及其临床意义，掌握该领域技术和临床应用的最新进展

场地与设备

• 细胞遗传学实验室应划分为细胞培养室、标本制备室和报告室
• 细胞培养室需配备超净工作台和空气消毒设施
• 标本制备室应具备强大的排气系统，各功能区需进行温度控制，并按需安装其他设施和设备

样本与数据管理

• 建立综合染色体核型分析报告系统和实验室信息系统（LIS）
• 有效管理样本和数据，包括原始标本、细胞悬液、染色体玻片、电子图像、实验记录和数据等
• 规定不同样本和数据的保留期限
• 共识9：染色体核型分析技术员需遵守实验室质量管理标准，合理设计功能区并配备合适设施和仪器（推荐强度：中度，A级证据）
• 共识10：实验室应有效管理样本和数据，严格遵守保留期限（推荐强度：中度，A级证据）

结论

• 染色体核型分析是宏观检查，需与分子生物学检测结果相互印证
• 该分析过程耗时且依赖人员手动技能，需积累实践经验、加强质量控制和持续技能培训
• 检测结果受实验条件影响大，实验室需建立适合的条件和质量管理系统
• 分析师报告前应与临床医生充分沟通以确保结果准确性
• 本共识旨在为血液系统恶性肿瘤的诊断和治疗提供参考，规范操作、加强质控、提高培养成功率和分析准确性